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一种定点突变的黑曲霉6-4光修复酶及其构建方法

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专利号 2019103161332 专利名称 一种定点突变的黑曲霉6-4光修复酶及其构建方法
专利类型 发明专利 国际分类 C12N9/00;C12N15/70;C12N15/52
申请人 安徽师范大学 申请地址 安徽省芜湖市弋江区九华南路189号
发明人 朱国萍;文斌;王胜地;徐蕾;王鹏;黄士平;曹正宇;汪源;卞命杰 申请日期 2019-04-17
下证状态 未知 更新时间 2022-09-19 11:41:50
专利摘要 本发明公开了一种定点突变的黑曲霉6‑4光修复酶及其构建方法,所述的光修复酶具有有SEQIDNO:1,所示的核苷酸序列。本发明从现有的WT黑曲霉中获得6‑4光修复酶基因基因序列,进行人工密码子优化之后,设计突变引物得到突变的基因片段,连接基因片段与pET22b质粒,构建出重组表达质粒;将该重组质粒转化到大肠杆菌感受态细胞,构建出用于光修复酶表达的基因工程菌在20℃和1mMIPTG条件下获得了较好的表达。相比于WT光修复酶,本发明表达出的突变体酶S460N的活性更高,而且活性保持更加持久稳定,能更好的修复紫外线造成的DNA损伤,更有利于作为化妆品类,医药类产品的添加成分应用于人们的生活。

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